细胞爬片步骤

　　(1)储存液：1:10稀释液可以保存在4℃里，三个月内仍然可以使用。稀释、储存和吸取多聚赖氨酸要使用塑料制品。

　　工作液：0.1%(w/v)PLL，用移液枪吸取0.3ml PLL＋3ml无菌去离子水，混匀放于10ml无菌塑料离心管中。封口模密封后4℃存放。

　　(2)无菌处理：PLL不可以高温消毒，故应过滤除菌分装于无菌处理的细胞冻存管内，1ml/管，封口模密封，4℃保存。另外，准备无菌去离子水50ml。

　　细胞爬片方法与技巧

　　爬片的准备：

　　1、爬片可用一般的盖玻片，也可用爬片；

　　2、应用盖玻片，可根据自己的需要剪裁成合适的大小，以备置于6孔板、12孔板或24孔板；

　　3、将剪裁好的爬片，置于浓硫酸中浸泡并过夜，第二天先用自来水冲洗20遍，再用三蒸水冲洗3遍（个人认为主要目的是冲洗干净就可以了），放在饭盒或者培养皿（一定是玻璃的哦，要不然就„„）中烘干后进行高压消毒。

　　培养板的准备：

　　1、泡酸过夜

　　2、冲洗，烘干（1、2步骤与前大致相同）

　　3、放入超净工作台用紫外线照1～2小时就可以用了（在照之前可以将爬片一并放入，若细胞贴壁能力不强，可经多聚赖氨酸浸片后放入。贴壁能力强的话，就可以省略了，进行紫外线消毒）

　　注：此步自己的经验是爬片可以先浸入消毒后的PBS内，紧接着放入培养板内。目的：

　　浸过PBS的爬片依靠表面的液体，可以用培养板孔底贴和紧密，以利于细胞长到爬片上。（自己刚开始做的时候，经常就是细胞全都长在了爬片与培养板之间，爬片上细胞罕见。）

　　细胞爬片：

　　1、胰酶消化细胞后计数

　　2、根据自己的需要选择合适的细胞密度种入培养板内即可

　　3、第二天即可进行干预措施